Las neoplasias malignas son un grupo de enfermedades que incluye varios miles de tipos de tumores de diferentes tipos y diferentes grados de malignidad. Se dividen en grandes grupos dependiendo de los tejidos a partir de los cuales se desarrollan: si son de tejidos epiteliales (barrera), entonces estos son cánceres, si son de tejidos conectivos (tejidos blandos y huesos) – sarcomas, si son de linfoides (inmunes) – linfomas/leucemias . La corrección y la eficacia del tratamiento dependen de qué tan correctamente se verifique el tumor (se determina su tipo, grado de malignidad y otras características). Los estudios histológicos juegan un papel importante en esto.
El jefe del departamento anatomopatológico con la prosectura del Centro Nacional de Investigación Médica de Oncología que lleva el nombre de N.N. N. N. Petrova, Ph.D. Anna Sergeevna Artemyeva.
¿Cuál es el material para estudios patomorfológicos (histológicos)?
Un pedazo de tejido del paciente: piel, membranas mucosas, órganos internos, huesos, cerebro y médula espinal, etc., la llamada biopsia.
El proceso de obtención de un fragmento de tejido (biopsia), una biopsia, son varias formas diferentes de tomar material para el examen histológico.
- Biopsia por punción: “empuje”, una aguja delgada o gruesa. Las biopsias con aguja rara vez tienen un diámetro superior a 1-2 mm.
- Biopsia con bisturí: abierta o endoscópica (mínimamente invasiva), incluida la laparotoraco-mediastinoscopia.
Una biopsia de los órganos internos se realiza con navegación por ultrasonido o con la ayuda de una intervención quirúrgica.
El material quirúrgico es todo lo que se extrae durante la operación, por regla general, un órgano o parte de él, o varios órganos y/o partes de ellos con o sin formación (tumor).
¿Cómo se procesan estos materiales para el examen histológico?
Etapa 1. Fijación: “preservación” de la biopsia en formalina: una solución química especial que previene la descomposición y le permite salvar estructuras de tejido.
La reparación de una biopsia puede tomar de 6 a 24 horas, dependiendo de su tipo y tamaño.
El material quirúrgico se fija por más tiempo, en varias etapas. Primero, la prefijación, que dura aproximadamente 12 horas. Luego se cortan los fragmentos necesarios y se vuelve a fijar por otras 24 horas.
La relación entre el volumen de material y el volumen de formalina debe ser de 1:20.
Etapa 2. El procesado es el proceso de deshidratación, desengrasado e impregnación del material con parafina. La máquina mueve una pieza de material de una solución a otra.
Se utilizan como soluciones: alcohol isopropílico absoluto (6-8 turnos), xileno (2 turnos), parafina fundida (2 turnos).
El programa difiere para el material “graso” (que incluye, por ejemplo, tejido mamario) y “no graso”: 36 y 24 horas, respectivamente.
El proceso de obtención de bloques de parafina.
Etapa 3. Fabricación de un bloque de parafina. Se coloca una pieza de material en un molde con parafina fundida (que ya es diferente que durante el procesamiento, con un punto de fusión más alto) y se enfría. Se hace manualmente, es difícil acelerar.
Etapa 4. rebanar El espesor de la muestra – un trozo de tejido incrustado en parafina – 1-3 mm. El grosor de cada rebanada es de 4-5 micras (0,004-0,005 mm). Realizado por un asistente de laboratorio utilizando una herramienta especial: un micrótomo.
Las secciones se montan sobre vidrio y deben secarse.
A pesar de que parte del material se pierde durante la alineación en un microtomo, con la debida profesionalidad, es posible hacer alrededor de 100 portaobjetos (micropreparaciones) a partir de una muestra: material de una biopsia, material quirúrgico de un tumor.
¿Para qué sirven los cortes?
Se realizan cortes para tinciones de rutina con hematoxilina y eosina, inmunohistoquímica y otros tipos de estudios.
Las secciones para todos los estudios son iguales, el color es diferente, los vidrios en los que se montan pueden diferir, por lo que se necesitan vidrios adhesivos especiales o vidrios cargados para IHC y FISH.
Los bloques y portaobjetos pueden almacenarse durante muchos años y utilizarse para estudios histológicos adicionales, revisiones, así como con fines científicos.
El archivo de materiales histológicos se recoge en el N.N. N. N. Petrov desde 1927 y contiene más de 10 millones de artículos (micropreparaciones: vasos, bloques de parafina, tarjetas de archivo, archivo húmedo).
¿Qué tipos de estudios histológicos son los más informativos?
- Examen histológico
- Inmunohistoquímica (IHC)
- La hibridación fluorescente in situ (FISH), puede ser cromófoba (mismo principio, diferente tipo de etiqueta)
Que te permitan determinar los diferentes tipos de estudios histológicos
Examen histológico: ¿qué es?
Le permite verificar el tumor, es decir, determinar en qué células consiste (de qué tejido se desarrolla), el grado de su diferenciación (madurez).
La tinción de rutina, realizada durante el examen histológico, le permite identificar el proceso patológico en el material analizado (biopsia, material quirúrgico):
- inflamación,
- inflamación específica,
- anomalía del desarrollo,
- tumor.
Además, en la mayoría de los casos, debido a la tinción de rutina, es posible determinar el grado de malignidad del tumor y, si es lo suficientemente maduro, cuál es su naturaleza.
Secciones teñidas bajo un microscopio
Carcinoma ductal invasivo er 100%.
Carcinoma de colon sigmoide.
Tumor neuroendocrino de células grandes.
Tumor neuroendocrino de células grandes MTS.
Cáncer de mama inespecífico. Sitio de carcinoma in situ dentro del conducto, tipo cribiforme.
Cáncer de esófago pobremente diferenciado.
El examen histológico de la biopsia y del material quirúrgico puede evaluar la prevalencia: el tamaño del tumor y la germinación en los tejidos circundantes, qué tan afectados están los ganglios linfáticos y si hay metástasis a órganos distantes (si todas estas estructuras fueron enviadas para examen histológico). ). Cuando se consultan micropreparaciones listas para usar: anteojos, esto generalmente no es posible si el tumor es más grande que el tamaño del casete histológico o si un investigador anterior lo diseccionó y no se proporcionan datos de examen macroscópico.
Durante el examen histológico, se estudian todos los vasos de una muestra, material obtenido de una intervención, una operación o una biopsia, independientemente de su número, esto se considera una consulta.
El momento del examen histológico depende de la cantidad de micropreparados y la categoría de complejidad del proceso que se encuentra en ellos, el tiempo puede extenderse, especialmente si es necesario utilizar métodos de investigación adicionales y analizar información adicional. El momento del examen histológico se ve afectado por la integridad de la información clínica proporcionada por el paciente, incluidos los datos de estudios ya realizados.
Inmunohistoquímica (IHC)
Se realiza un estudio complejo de varias etapas después de un examen histológico en el mismo material. Las secciones del tumor se tiñen con anticuerpos que pueden unirse a los antígenos (proteínas) transportados por las células tumorales. Diferentes células tumorales portan diferentes antígenos, a cada uno de los cuales, como la llave de una cerradura, se ajusta un anticuerpo.
Una de las etapas de la IHC
La investigación IHC es combinatoria. No existen marcadores 100% específicos y sensibles a un determinado tumor, pero hay un conjunto de antígenos que deberían estar en un determinado tipo de tumor y un conjunto de los que no deberían estar, por lo que el panel IHC está construido para incluyen varios anticuerpos que deben ser positivos y algunos que deben ser negativos. Estos conjuntos de marcadores positivos/negativos difieren para diferentes tumores.
Al realizar IHC de pronóstico: identificar marcadores de sensibilidad a la terapia, se determina un conjunto de dichos marcadores para tumores específicos, por ejemplo, cáncer de mama: receptores de hormonas esteroides (estrógeno, progesterona), receptor del factor de crecimiento epidérmico (HER2) e índice de proliferación. actividad Ki67 (tasa de división celular) .
Los portaobjetos se tiñen secuencialmente: los conjuntos de marcadores se tiñen con diferentes anticuerpos en varias etapas, el proceso de teñir los portaobjetos con un anticuerpo tarda 48 horas.
Por lo tanto, cada anticuerpo se aplica a una sección de tejido separada montada en un vaso separado, generalmente con un control externo apropiado, la cantidad de reacciones (anticuerpos usados) y los pasos de tinción pueden variar significativamente según la situación de diagnóstico específica, todo depende de la persona. características del tumor. Se lleva a cabo tal número de tinciones, que es necesario para identificar el conjunto más característico de marcadores positivos y negativos para un tumor en particular.
Para alguien, 5 anticuerpos serán suficientes para esto, y alguien necesita hacer 20 o más tinciones. El número máximo de colores que tuvimos que hacer es 212.
Por lo tanto, el momento exacto y el costo de este estudio no se pueden determinar de antemano. Los tumores de diferente curso y pronóstico pueden ser muy similares entre sí, solo las diferencias mínimas en la tinción, teniendo en cuenta los datos clínicos y los datos de otros métodos de examen, pueden hacer posible establecer el diagnóstico correcto.
Hay una serie de tumores benignos que imitan a los malignos, incluidos los muy agresivos, y algunos tumores malignos muy diferenciados son difíciles de distinguir de los procesos inflamatorios y reactivos. En tales situaciones, sólo la experiencia y cualificación del patólogo, el análisis de toda la gama de información disponible (tomografías computarizadas, resonancias magnéticas, radiografías, protocolo de operación, etc.) permiten realizar un diagnóstico.
En la interpretación competente de los resultados de la IHC, el papel de un experto es muy importante, porque los casos con los que tienes que trabajar son, en su mayoría, complejos. Prácticamente no existen anticuerpos que puedan actuar como marcadores al 100% de un tumor en particular, el médico siempre tiene que sopesar varias probabilidades.
¿Qué determina la IHC?
- La presencia de receptores para las hormonas progesterona y estrógeno en el cáncer de mama;
- Expresión de HER-2/neu en células de cáncer de mama, cáncer de estómago;
- Determinar los linfomas de Hodgkin y no Hodgkin: establecer un diagnóstico preciso de linfoma hoy en día es imposible sin el uso de este tipo de estudio.
- Determinar si se trata de un tumor primario o metástasis, afiliación tisular de las metástasis.
La inmunohistoquímica permite evaluar la tasa de crecimiento potencial del tumor, la respuesta a la quimioterapia, la terapia hormonal dirigida.
Hibridación fluorescente in situ (prueba FISH)
Este es un método de diagnóstico genético molecular en tejido.
FISH se lleva a cabo en una sección de tejido y le permite unir un reordenamiento genético a una célula tumoral específica.
Esta prueba también utiliza tintes especiales que solo se unen a ciertas regiones de los cromosomas. Se llaman sondas, que se pueden marcar con un tinte fluorescente o cromogénico, visualizadas usando un microscopio fluorescente o de luz.
Las operaciones técnicas para la preparación de láminas histológicas para este estudio demoran 2 días hábiles.
Análisis de la preparación utilizando un microscopio multicabezal.
Las micropreparaciones resultantes son muy sensibles al entorno externo: pueden desvanecerse con el tiempo, para evitar la pérdida de información, se escanean todas las diapositivas FISH, se crea su copia digital, que está disponible para revisión externa. Los expertos ven el material fluorescente en un campo oscuro, al menos 2 especialistas participan en el análisis de la droga. Si es necesario, también se utiliza el análisis digital.
¿Qué determina la prueba FISH?
La prueba FISH permitirá diagnosticar algunos tipos de tumores, determina la idoneidad del uso de ciertos medicamentos de quimioterapia.
- la presencia de amplificación de HER2 se determina en casos de resultados límite según IHC, lo cual es necesario para el nombramiento de terapia dirigida;
- se lleva a cabo el diagnóstico, es decir, la identificación de reordenamientos genéticos específicos de un determinado tipo de tumor, cuando es imposible establecer finalmente un diagnóstico utilizando métodos más simples, en la mayoría de los casos se trata de sarcomas de tejidos blandos y tumores cerebrales;
- anormalidades genéticas que causan cáncer de un órgano en particular;
- en los linfomas, esta técnica se utiliza con fines diagnósticos y para identificar factores de mal pronóstico, es decir, indicaciones de intensificación precoz del tratamiento.
Realizar un examen histológico y, en primer lugar, una prueba FISH, es un trabajo experto que depende de las calificaciones de un especialista. Muchas mutaciones que se detectan en los tumores no siempre son marcadores tumorales, también se pueden encontrar en formaciones benignas o tejidos normales.
Durante un año, el departamento de anatomía patológica del Centro Nacional de Investigaciones Médicas de Oncología que lleva el nombre de N.N. Petrova realiza alrededor de 20000 5000 estudios histológicos (pacientes), de los cuales alrededor de 30000 casos de consulta (revisiones), más de XNUMX XNUMX estudios IHC, y también participa en el programa de control de calidad externo NordIQ IHC.
Los especialistas del departamento cuentan con vasta experiencia en la realización de estudios histológicos y competencias de experto.
¡Recuerda! Los estudios histológicos son el punto de partida, la precisión del diagnóstico y la eficacia del tratamiento prescrito dependen de lo bien que se realicen.
La rapidez de los estudios histológicos y la adecuación de la conclusión histológica dependen de una serie de factores:
- Calidad de vidrios y bloques;
- Integridad del suministro de vasos (es necesario proporcionar todos los vasos y bloques);
- Proporcionar al paciente información adicional que ayudará a interpretar correctamente los datos del examen histológico, IHC y FISH, a saber: datos sobre la historia de la enfermedad, datos sobre enfermedades concomitantes, principalmente infecciosas (VIH, hepatitis); todos los datos de todos los exámenes e intervenciones: radiografías, tomografías computarizadas, resonancias magnéticas, ecografías, protocolos de operaciones, extractos.
Después de realizar un examen histológico, el paciente recibe una conclusión/protocolo histológico para el estudio del material histológico.
Descifrando el examen histológico: ¿qué buscar?
La conclusión histológica incluye varios encabezados (campos):
Descripción macroscópica
Se rellena tanto para muestras de biopsia, no necesariamente, como para material quirúrgico, para el que es extremadamente importante en algunos casos.
Descripción microscópica
Descripción de los cambios a nivel microscópico, no obligatorio, ya que toda la información necesaria se puede reflejar en el campo “conclusión”.
Resultados del estudio inmunohistoquímico
Este campo describe qué anticuerpos se utilizaron en este caso y cuál fue el resultado de la tinción: presencia de tinción o no, localización en la célula si es necesario, así como el porcentaje de células positivas y la intensidad de la reacción, cuando importa.
Conclusión anatómica patológica
Contiene una unidad nosológica/de clasificación, si es posible establecerla según el material estudiado, es decir, da respuesta a las preguntas:
- ¿Es un tumor primario o una metástasis?
- ¿Dónde se encuentra el tumor primario?
- Cuál es el tipo histológico del tumor (de qué tipo de células se compone).
También se dan todos los datos pronósticos necesarios: grado de diferenciación, parámetros que afectan al estadio, estado de los márgenes de resección, si es posible evaluarlos, etc.
Notas y recomendaciones adicionales
El campo puede contener comentarios sobre la posible dirección de un examen más profundo, la probabilidad de un diagnóstico particular, la necesidad de familiarizarse con ciertos datos clínicos, etc.
No recomendamos que los pacientes descifren de forma independiente los parámetros del examen histológico utilizando información obtenida de varios sitios de Internet y foros de pacientes, ya que una gran cantidad de factores afectan la interpretación de los datos, incluida la edad del paciente, datos de otros estudios, etc.
Solo un especialista puede ocuparse de descifrar el estudio: ¡un oncólogo según el perfil de la enfermedad!
Publicación del autor:
ARTEMIEVA ANNA SERGEEVNA
jefe del departamento anatomopatológico con prosección de la Institución Presupuestaria del Estado Federal “N.N. N. N. Petrov» del Ministerio de Salud de Rusia, Candidato de Ciencias Médicas
Qué es lo que hay que hacer
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El examen histológico es el “estándar de oro” para el diagnóstico de muchas enfermedades, principalmente procesos oncológicos.
¿Qué es un análisis histológico?
En la práctica médica, para el diagnóstico de la patología oncológica, el examen histológico se considera el estándar de oro.
Entonces, análisis para histología: ¿qué es y por qué se realiza? Por extraño que parezca, pero aún muchos no saben cuál es el método histológico de investigación. Intentaremos hablar breve y claramente sobre este método, sus principales variedades.
El método histológico de investigación es la investigación principal y principal, que en la mayoría de los casos es necesaria y decisiva para hacer un diagnóstico. En la mayoría de los casos, es posible hacer un diagnóstico final en un paciente que se ha sometido a numerosos estudios solo después de recibir una conclusión histológica. Dado que este método es el único que puede detectar la presencia de tejidos atípicos en muestras biológicas, cortes o frotis, su uso en oncología es indispensable.
Tipos de diagnóstico histológico
La toma de material para el examen histológico se lleva a cabo mediante varios métodos que se utilizan en nuestra clínica:
- el legrado (legrado de diagnóstico fraccionado del útero) se realiza con una herramienta especial: una cureta;
- la biopsia central se realiza con una aguja especial y una pistola de biopsia;
- se realiza una biopsia por punción con una aguja de biopsia especial, con la ayuda de la cual se toma tejido en una columna. Para obtener tejido de un sitio específico, lo mejor es usar una guía de ultrasonido o un endoscopio;
- la biopsia por aspiración implica el uso de un aspirador para obtener una muestra de tejido;
- la biopsia de escarificación consiste en tomar material de una sección delgada (se usa con mayor frecuencia para sospechas de neoplasias cutáneas);
- una biopsia por incisión le permite al médico tomar tejido para examinarlo durante la cirugía;
- biopsia por escisión: examen de tejidos del material obtenido después de la cirugía;
- Biopsia electroquirúrgica en asa: toma de material utilizando un asa bajo alto voltaje;
- conización: extracción de tejidos del cuello uterino con una máquina láser, un bisturí o un bisturí de ondas de radio;
- frotis del canal cervical con un cepillo cepillo.
¿Con qué frecuencia visita al ginecólogo?
El costo del diagnóstico histológico
Servicios
Para evitar posibles malentendidos, le recomendamos que aclare el costo de los servicios el día de comunicarse con la recepcionista o el centro de llamadas al número de teléfono 8 (800) 551-99-03
Показания
Los estudios histológicos no están indicados para todas las mujeres que acuden al médico.
La lista de indicaciones cuando los análisis histológicos son necesarios incluye:
- diagnóstico de la condición patológica del cuello uterino;
- papilomas en el cuello uterino;
- erosión del cuello uterino y cambios similares a él;
- heterogeneidad de la capa interna del útero en la ecografía;
- sangrado de los tejidos superficiales del cuello uterino al contacto (examen, sexo);
- cambio de color, estructura del órgano cuando se ve en espejos o durante una colposcopia;
- diagnóstico de neoplasias;
- para aclarar la etapa o confirmar la presencia de un proceso oncológico en el órgano;
- falta de concepción dentro de un año de actividad sexual regular sin el uso de anticonceptivos;
- aborto involuntario habitual;
- embarazo congelado;
- muerte fetal en la historia;
- condilomatosis;
- quiste del cuello uterino, ovario;
- leucoplasia;
- proceso inflamatorio crónico lento;
- Cambios metaplásicos en las células.
Противопоказания
Un análisis de histología en ginecología no se lleva a cabo debido a su falta de información solo en caso de inflamación aguda, menstruación o con recuentos bajos de plaquetas.
Preparación para el examen histológico
No hay una preparación especial del paciente en la víspera de la toma de muestras, pero los médicos recomiendan no vivir sexualmente el día de la toma de muestras, no usar ungüentos, cremas y tampones vaginales.
Para realizar un examen histológico, el médico no solo debe obtener correctamente el material (biopsia), sino también entregarlo correctamente al laboratorio e interpretar los resultados. Puede obtener material para la investigación de diferentes maneras, depende del órgano y del presunto diagnóstico.
Después de recibir el material, el médico lo coloca inmediatamente en un recipiente estéril, premarcado y que contiene un fijador. El fijador más utilizado es la formalina. Después de eso, el material para la investigación se entrega al laboratorio.
El histólogo o asistente de laboratorio procesa el tejido y tiñe sus secciones usando soluciones. En uno de los microscopios (luz, luminiscente, electrónico y otros), el médico examina secciones de tejido.
El diagnóstico histológico permite estudiar no solo las estructuras celulares y la sustancia intercelular, sino también determinar la composición de los tejidos cuantitativos.
Como es el analisis
En la mayoría de los casos, no se requiere anestesia para el examen histológico cuando se toman tejidos. En casos raros, hay que recurrir a la anestesia local. En cuanto a las complicaciones después de la toma de muestras de tejido, son muy raras. En muy raras ocasiones, puede haber sangrado en el sitio de muestreo, que debe ser cauterizado.
Para prevenir infecciones, los médicos recomiendan no usar tampones vaginales, óvulos, duchas vaginales y no tener relaciones sexuales después de la biopsia.
Pero para obtener un resultado de estudio preciso y de alta calidad, el material se procesa en varias etapas:
- Etapa de fijación (para evitar la descomposición y descomposición del material, se coloca en formalina a razón de 1:20 durante 6-24 horas, lo que depende de la estructura del tejido en estudio
- Procesado (etapa de deshidratación, desengrasado e impregnación con parafina)
- La creación de un bloque de parafina implica la colocación del material de prueba en bloques con parafina de alta temperatura, seguido de su enfriamiento.
- La etapa de hacer secciones de 1 a 3 mm usando un micrótomo, seguido de colocarlos en portaobjetos de vidrio para su estudio.
¿Cuánto tiempo lleva preparar un resultado de histología?
¿Cuánto cuesta un análisis histológico? Tomará al menos siete días obtener un resultado confiable. En la mayoría de los casos, el resultado se conoce el décimo día desde el momento de su recolección. En ocasiones hay que recurrir a una biopsia exprés, se realiza intraoperatoriamente para determinar el alcance de la operación. En este caso, el análisis está listo en unos minutos, pero no es tan fiable como estudiar secciones teñidas.
Resultados de la prueba
Los análisis de histología en ginecología solo pueden ser interpretados por un médico, teniendo en cuenta los resultados de estudios y documentos adicionales. El médico, después de estudiar el material, da una conclusión detallada describiendo los cambios morfológicos identificados por él y el diagnóstico morfológico. Sucede que un patólogo no puede hacer un diagnóstico debido a la cantidad insuficiente de material o la poca especificidad de los cambios encontrados. En este caso, la conclusión indica solo una descripción a nivel microscópico.
Es imposible llegar a una conclusión de inmediato, porque el proceso de preparación del material requiere que el médico realice algunas manipulaciones, por lo tanto, pasan varios días y, a veces, una semana desde el momento en que se entrega el material al laboratorio.
Entonces, solo un análisis histológico le da al médico la oportunidad de hacer un diagnóstico final, teniendo en cuenta el examen, la anamnesis y los resultados de métodos de diagnóstico adicionales. No se involucre en el autodiagnóstico y la interpretación de los resultados. Vale la pena buscar ayuda de especialistas altamente especializados.
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